1.1.1臭氧處理水培育中華絨螯蟹苗優(yōu)化條件的試驗(yàn)研究
目前河蟹育苗工藝都采用靜水充氣、開放式工藝。每天需要更換大量海水，以增加育苗池中的溶解氧來改變水質(zhì)污染程度，同時(shí)還需使用藥物來抑制致病菌的繁殖。但到育苗后期，池底有機(jī)質(zhì)沉積過多，造成池水下層氧債高，致病菌大量繁殖，水質(zhì)惡化，造成幼體大量死亡。因此，利用經(jīng)臭氧處理后的水體來維持良好的生態(tài)環(huán)境，為河蟹幼體提供一個(gè)良好的水環(huán)境已成為河蟹育苗成敗關(guān)鍵。
為了找出臭氧水河蟹育苗的優(yōu)化條件，進(jìn)行臭氧處理水量、育苗密度、換水量三因素三水平正交試驗(yàn)，并利用灰色系統(tǒng)關(guān)聯(lián)度分析方法，分析因素之間作用關(guān)系，以期獲得臭氧水添加量，育苗密度、換水量的合理組合、驗(yàn)證臭氧在河蟹育苗中的作用，總結(jié)出臭氧處理水進(jìn)行河蟹工廠化育苗的優(yōu)化工藝 。
該試驗(yàn)于 1997 年 3 — 4 月在塘沽塘寧水產(chǎn)育苗進(jìn)行，應(yīng)用由天津市水產(chǎn)研究所和清華大學(xué)共同研制的 QT 一 20 臭氧水處理器，臭氧投加量為每立方米水體 1 — 1.5 g
1.2.1.1 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)
試驗(yàn)因素的確定： A 一臭氧水添加量： B 一幼體密度； C 一換水量。試驗(yàn)水平確定：每個(gè)因素設(shè)三個(gè)水平，見表 3. 試驗(yàn)分組方案；采用 L 9 (3 4 ) 正交表共設(shè) 9 個(gè)試驗(yàn)組 . 試驗(yàn)期間投喂餌料種類為單胞藻、蛋黃、酵母、螺旋藻粉、輪蟲及鹵蟲無節(jié)幼體 . 每天測定一次 p H 值、鹽度，隔天測定一次溶解氧 .Z 1 一 Z 2 和 Z 3 一大眼幼體期間，對(duì)氨氮、亞硝酸氮、硝酸氮、耗氧量和細(xì)菌總數(shù)等指標(biāo)進(jìn)行測定 .
表 3 臭氧育河蟹苗試驗(yàn)因素水平表

1.2.1.2 試驗(yàn)結(jié)果
試驗(yàn)所用時(shí)間 16 天，河蟹大眼幼體出苗情況試驗(yàn)結(jié)果見表 4 。
表 4 河蟹大眼幼體出苗試驗(yàn)結(jié)果

1.2.1.3 灰色系統(tǒng)關(guān)聯(lián)度分析
利用灰色系統(tǒng)關(guān)聯(lián)度分析方法，計(jì)算出水質(zhì)生化條件對(duì)出苗量影響的關(guān)聯(lián)度，排出關(guān)聯(lián)序，以直接反映出各個(gè)子序列對(duì)同一個(gè)母序列的“優(yōu)劣”或“主次”關(guān)系，從而找出影響出苗量的各個(gè)生化因素間的主次關(guān)系。
利用處理后的數(shù)據(jù)進(jìn)行氨氮、亞硝酸鹽、耗氧量、細(xì)菌總數(shù)對(duì)河蟹出苗量影響的關(guān)聯(lián)度計(jì)算。設(shè)出苗量為母序列，表示為 X l (k)(k=1 ， 2 ，…… 9 為試驗(yàn)組編號(hào) ) 則： X 1 (k)= （ (X 1 (1) ， X 1 (2) ，……， X 1 (9) ），設(shè)氨氮、亞硝酸鹽、耗氧量、細(xì)菌總數(shù)為子序列，分別表示為： X 2 (k) 、 X 3 (k) 、 X 4 （ k ）、 X 5 (k) ，求得關(guān)聯(lián)度 R ：
R=(r 1,2 ， r 1 ， 3 ， r l,4 ， r 1 ， 5 )=(0.210 ， 0.172 ， 0.199 ， 0.249)
上述結(jié)果表明，水體中細(xì)菌總數(shù)對(duì)河蟹出苗量影響最為顯著，其次是氨氮、耗氧量，而亞硝酸鹽影響最小。從表 5 中可以看出，水中氨氮、耗氧量對(duì)試驗(yàn)因素中的臭氧水添加量的關(guān)聯(lián)度最大，亞硝酸鹽對(duì)布苗密度關(guān)聯(lián)最大。表明臭氧處理水可有效改善育苗水環(huán)境中氨氮、 COD 狀況，其中添加臭氧水育苗的各試驗(yàn)組的氨氮、 COD ，均明顯低于對(duì)照組。氨氮可下
降 31.59 — 31.89 ％， COD 下降 30.66 ～ 45.33 ％，細(xì)菌總數(shù)下降 34.17 — 58.35 ％。
表 5 試驗(yàn)因子對(duì)應(yīng)水化指標(biāo)的關(guān)聯(lián)度

水源經(jīng)臭氧處理后，阻斷了致病菌進(jìn)入育苗水體的途徑，且有利于有益細(xì)菌的生長，有利于降解有機(jī)物質(zhì)，從而改善了育苗池生態(tài)環(huán)境。
1.2.1.4 因素水平優(yōu)化組合分析
根據(jù)表 6 可以看出，三個(gè)指標(biāo)的計(jì)算結(jié)果針對(duì)三個(gè)因素的主次順序分別為：出苗量 A>C>B ，出苗密度 B>A>C ，活力系數(shù) B>>A ， C 。從出苗量這一指標(biāo)來看，優(yōu)化水平組合應(yīng)為 A 3 C 3 B 3 ：從出苗率指標(biāo)看，應(yīng)為 B 1 A 3 C 3 ；從活力系數(shù)指標(biāo)看，應(yīng)為 B 3 A 3 C 1,3 。對(duì)三組綜合分析看，因素的優(yōu)化組合應(yīng)為 A 3 B 1 C 1 。
表 6 河蟹育苗試驗(yàn)綜合分析表

1.2.1.5 分析和小結(jié)
育苗水源經(jīng)臭氧處理后，水中氨氮、耗氧量、亞硝酸鹽和細(xì)菌總數(shù)都可以得到大幅度的降解，其降解幅度與臭氧投加量緊密相關(guān)。由于臭氧在水中發(fā)生還原反應(yīng)，產(chǎn)生氧化能力極強(qiáng)的原子氧 (O) 和羥基 (OH) ，能迅速氧化水中的有機(jī)物質(zhì)、殺滅細(xì)菌。因此，池中水質(zhì)得到了明顯凈化，并且無毒、無害、無任何殘留物，為河蟹幼體提供了一個(gè)良好的生態(tài)環(huán)境，可以有效地提高出苗量，是適合于河蟹育苗生產(chǎn)上應(yīng)用的水處理技術(shù)。
從關(guān)聯(lián)度分析結(jié)果表明，影響出苗量的作用因子的主次順序?yàn)椋杭?xì)菌總數(shù) > 氨氮 > 耗氧量 > 亞硝酸鹽。其中細(xì)菌是主要作用因素，尤其是厭氧的致病菌。經(jīng)綜合推斷，布苗密度與細(xì)菌總數(shù)緊密相關(guān)。因此，合理密度是高效育苗的一項(xiàng)重要措施。從整體考慮，工廠化育苗全部使用臭氧水，加上換水量適當(dāng)，采用合理的布苗密度即 A 3 B 1 C 1 是優(yōu)化的組合。
2.2.2臭氧在內(nèi)陸水域育苗水處理工藝
1997 — 1998 年，分別在天津市大港油田鉆井一公司育苗場和江蘇省揚(yáng)州市江洋特種水產(chǎn)公司育苗場進(jìn)行了臭氧水處理為主的綜合水處理工藝的研究。前者距海岸 20 余公里，育苗水體為 1445M 3 ; 后者距海岸 200 余公里，育苗水體為 2100M 3 。水源均以鹽場的鹵水來配制用以育苗，用水量共為 5.6 萬噸。 經(jīng)臭氧處理后循環(huán)封閉使用，以用于培養(yǎng)單細(xì)胞藻類、親蟹暫養(yǎng)、育苗等，共培育出大眼幼體 559.5 公斤，在生產(chǎn)上取得了突破。具體做法如下：
2.2.2.1 水源配置和設(shè)施
兩個(gè)育苗場都用車、船從海邊拉運(yùn)鹽場的鹵水。鹵水鹽度為 42 — 900‰ 配制成 18 — 23‰ 。鹽度的水作為育苗水源。
1.2.2.2 水處理機(jī)、功能、處理量
選用由天津市水產(chǎn)研究所、清華大學(xué)共同研制的 QT 一 20 型臭氧水處理機(jī)。該機(jī)具有體積小、重量輕、效率高、使用方便等特點(diǎn)。其主要功能是清除有毒有害物質(zhì)、殺菌滅藻、氧化部分重金屬離子和有機(jī)物。處理后的水質(zhì)符合漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)。在育苗過程中循環(huán)使用凈化水，處理水量 10 — 20 噸／小時(shí)，可按凈化程度和水質(zhì)要求，任意調(diào)整水處理量。
1.2.2.3 水處理工藝流程
用鹵水配制育苗水源，經(jīng)沉淀、過濾后進(jìn)入育苗池供孵幼和培育幼體使用。育苗池排出的廢海水經(jīng)過濾和沉淀，通過臭氧水處理機(jī)處理，然后將處理水匯集到蓄水池，經(jīng)過濾沉淀進(jìn)入調(diào)鹽配水池，再經(jīng)過濾沉淀，并化驗(yàn)合格后再次進(jìn)入育苗池使用，形成閉式循環(huán)。
1.2.2.4 臭氧水處理效果和產(chǎn)量
育苗池排出的廢海水，經(jīng)過臭氧水處理機(jī)處理后，亞硝酸鹽顯著降解，再經(jīng)物理、化學(xué)和生物的綜合處理，其它多項(xiàng)水質(zhì)綜合指標(biāo)符合國家漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn) . 處理凈化的水質(zhì)變化見表 7 、表 8
表 7 1996-1997 年度大港河蟹育苗場臭氧處理水質(zhì)變化情況（處理量 5T/h ）

表 8 1997-1998 年揚(yáng)州市農(nóng)業(yè)發(fā)展總公司河蟹育苗場處理水質(zhì)變化情況

水處理的目的是避免海水排放后污染環(huán)境，育苗用水的循環(huán)使用，可節(jié)約大量配制海水，降低了生產(chǎn)成本。因此，利用臭氧處理水育苗，在工藝上是可行的，效果非常明顯。在河蟹育苗規(guī)?；a(chǎn)中應(yīng)用臭氧水處理技術(shù)后，育苗產(chǎn)量高而穩(wěn)定。 1997 年大港育苗場生產(chǎn)蟹苗 183 公斤 ( 其中早繁苗 150 公斤 ) ， 1998 — 1999 年揚(yáng)州育苗場生產(chǎn)蟹苗分別為 376 ． 5 公斤 ( 其中早繁苗 233 公斤 ) 和 635.5 公斤。見表 9 。
表 9 河蟹育苗（大眼幼體）產(chǎn)量

應(yīng)用臭氧處理水進(jìn)行河蟹育苗，一般可縮短孵化周期 2 — 3 天。同時(shí)蟹苗個(gè)體大，健壯且活力強(qiáng)。因此經(jīng)臭氧水處理技術(shù)閉式循環(huán)使用后，節(jié)約了海水和運(yùn)輸費(fèi)用，降低了成本，防止污染環(huán)境，經(jīng)濟(jì)效益、生態(tài)效益和社會(huì)效益相當(dāng)顯著。
2.3 臭氧對(duì)海水育苗中理化和生物影響的研究
2.3.1臭氧在海水育苗中對(duì)水質(zhì)理化指標(biāo)的影響
在海珍品育苗中，水質(zhì)是育苗成敗的的關(guān)鍵因素之一。伴隨海洋污染的日益加劇，赤潮的頻繁發(fā)生，海水育苗面臨嚴(yán)重的挑戰(zhàn)。同時(shí)，在內(nèi)陸地區(qū)進(jìn)行海水育苗，由于缺乏海水水源，必須使用配制海水進(jìn)行封閉式循環(huán)進(jìn)行育苗。因此，利用臭氧水處理技術(shù)改善凈化水質(zhì)，是今后海水育苗水處理技術(shù)的一個(gè)方向。為此，進(jìn)行臭氧對(duì)海水育苗中水質(zhì)理化指標(biāo)的影響試驗(yàn)，是一項(xiàng)十分必要的工作。 -
試驗(yàn)采用由天津市水產(chǎn)研究所和清華大學(xué)共同研制的臭氧水處理機(jī)產(chǎn)生的臭氧水，并改變混合器的流量，從而控制投入到水中的臭氧量，對(duì)所獲得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，以評(píng)價(jià)水質(zhì)狀況以及對(duì)幼體作用的影響。
2.3.1.1 臭氧投加量與水中剩余臭氧的關(guān)系
試驗(yàn)通過 8 次采樣，臭氧投加量為 (1.25 — 4.17) ppm ，剩余臭氧量為 (0.185 — 0.542) ppm ，通過前者 (x) 與后者（ y ）值及統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)，見表 10 。并對(duì)相關(guān)系數(shù) r 進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，結(jié)果表現(xiàn)為 t>>t 0.01 (t 0.01 =3.707).
表 10 水中投加臭氧量（ X ）與水中剩余臭氧量（ Y ）的值及統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)結(jié)果

試驗(yàn)表明，水中投加臭氧量與水中剩余臭氧量有顯著的正相關(guān)關(guān)系。這樣剩余的底濃度臭氧量可繼續(xù)對(duì)育苗池中的水質(zhì)起著進(jìn)一步的凈化作用。而對(duì)育苗幼體無害。
2.3.1.2 對(duì)水中氨氮、亞硝酸鹽、硝酸鹽的影響
水中氨氮是由 NH 4 + 和 NH 3 組成， NH 4 + 是無毒性，可被生物直接吸收，但 NH 3 具有毒性，使生物甚至死亡。亞硝酸鹽對(duì)育苗幼體易產(chǎn)生毒害作用，是硝化過程中的中間產(chǎn)物，硝鹽酸是硝化作用的最終產(chǎn)物，對(duì)育苗幼體無毒害，可被浮游植物直接吸收。根據(jù)試驗(yàn)表明，加大臭氧投加量，對(duì)氨氮具有較強(qiáng)降解作用，同時(shí)亞硝酸鹽被全部氧化，但硝酸鹽總體是在增加。表示水中硝化作用在正常進(jìn)行，對(duì)育苗水體的水質(zhì)改善起著極為重要的作用。
2.3.1.3 對(duì)水中有機(jī)物的降解作用
育苗水體中由于幼體的呼吸和排泄作用、殘餌的沉積等，使水體中有機(jī)物不斷積累溶解氧急劇下降，水質(zhì)逐漸惡化，能否降解水體中有機(jī)物，與海水育苗成敗關(guān)系密切。通過試驗(yàn)表明，臭氧對(duì)有機(jī)物的降解作用與水中 p H 有關(guān)， p H 越高，降解程度越大。由于育苗水體 p H 在 8.2~8.5 之間，處于 p H 偏高范圍，有機(jī)物的降解速度較快。
2.3.2臭氧殺滅海水中細(xì)菌的效果 .
臭氧殺滅海水中細(xì)菌的試驗(yàn)，是在大連碧龍海珍品有限公司的海膽育苗中進(jìn)行。試驗(yàn)中應(yīng)用天津市水產(chǎn)研究所和清華大學(xué)共同研制的臭氧水處理機(jī)來凈化和處理海水，取得了明顯的效果。
1996 年 8 月 1 日～ 8 月 14 日，分別對(duì)臭氧前后水質(zhì)和細(xì)菌數(shù)量進(jìn)行檢測，首先將海水水源經(jīng)臭氧水處理機(jī)處理后的臭氧水直接進(jìn)入海膽育苗池中，同時(shí)還將臭氧水放入大池，接種角刺藻，接種密度為 10 萬個(gè)／ ml ，長勢較好。一周后迅速繁殖到 100 — 200 萬個(gè)／ ml ，培育水體良好，未被原生動(dòng)物和雜藻等生物污染，培養(yǎng)成功后可以投喂海膽幼體。試驗(yàn)共進(jìn)行三次，均證明臭氧水可將海水中的細(xì)菌幾乎全部殺滅，達(dá)到育苗生產(chǎn)用水標(biāo)準(zhǔn)，回水再經(jīng)處理后，完全可以進(jìn)行海膽育苗。結(jié)果如表 11 、表 12 。
表 11 8 月 14 日臭氧處理海水后各項(xiàng)指標(biāo)分析

表 12 在 5T/h 條件下殺滅細(xì)菌效果比較

2.4 魚，蝦、藻，貝育苗臭氧應(yīng)用技術(shù)的研究
2.4.1臭氧技術(shù)在羅氏沼蝦育苗中的應(yīng)用
羅氏沼蝦是一種適于在淡水中生長的優(yōu)良的品種。為了能在內(nèi)陸水域和遠(yuǎn)離海域地區(qū)開展羅氏沼蝦養(yǎng)殖，必需提高育苗技術(shù)，繁育更多的蝦苗，尤其在無海水水源，又需要循環(huán)再利用的地區(qū)，提高單位水體育苗量至關(guān)重要。本項(xiàng)技
應(yīng)用試驗(yàn)共分三個(gè)組，每個(gè)組有 3 個(gè)試驗(yàn)池，第一組，每 2 天用臭氧處理機(jī)處理一次，第二組每 5 天處理一次，第三組每 10 天處理一次。每組三個(gè)試驗(yàn)池分別投入 5 ppm 、 l0 ppm 、 15 ppm 濃度的光合細(xì)菌。在整個(gè)試驗(yàn)過程中不換水，不施加任何藥物，每 2 天吸污一次，同時(shí)對(duì)水質(zhì)指標(biāo)進(jìn)行全面監(jiān)測。每天觀察蝦苗活力、發(fā)育 5 天的蝦苗測定體長體重 。該試驗(yàn)水泵流量為 5 m 3 ／小時(shí)，氧氣流量為 0.25-0.3 m 3 ／ h ，臭氧投放量為 1.5-2 g ／ m 3 ( 水體 ) 。
試驗(yàn)結(jié)果表明，每 5 ～ 7 天用臭氧水處理一次育苗用水，并結(jié)合投放 l0ppm 濃度光合細(xì)菌為最佳組合方式。其蝦苗生長速度快，出苗率較其它組合高出 10---14.2 ％，且節(jié)約成本。具體見表 13 。
表 13 育苗池出苗率統(tǒng)計(jì)

本試驗(yàn)在羅氏沼蝦工廠化育苗生產(chǎn)中的應(yīng)用是成功的，臭氧是一種理想的殺菌消毒劑、水質(zhì)凈化劑，可以節(jié)省大量的費(fèi)用，尤其在內(nèi)陸無海水源地區(qū)可以進(jìn)行育苗，
2.4.2臭氧水培育單細(xì)胞藻類的應(yīng)用以發(fā)展內(nèi)陸地區(qū)的羅氏漁蝦養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。
單細(xì)胞藻類的培育是育苗生產(chǎn)中的一個(gè)關(guān)鍵技術(shù)即先用次氯酸鈉或次氯酸鈣對(duì)水體進(jìn)行消毒，然后用硫代硫酸鈉中和過量的氯，再經(jīng)長時(shí)間曝氣后才能應(yīng)用于藻類的接種和培養(yǎng)。由于前期水處理時(shí)間過長，一定程度上制約了生產(chǎn)上的應(yīng)用。
本試驗(yàn)在江蘇省射陽縣阜寧育苗場進(jìn)行，試驗(yàn)用三角褐指藻由青島海洋所提供，試驗(yàn)溫度 9.4--10.5 ℃，鹽度為 19 ． 4---22.0 ％ o ，對(duì)照組使用三級(jí)沉淀的水，經(jīng)次氯酸鈉處理，再用硫代硫酸鈉中和和曝氣后應(yīng)目前一般進(jìn)行三級(jí)培養(yǎng)，基本采用化學(xué)消毒法，用。試驗(yàn)組也取三級(jí)沉淀的水，用臭氧處理機(jī)進(jìn)行處理，臭氧投加量為 1 g ／ m 3 ，處理后的用水潔凈透明、無菌、無藻、無原生動(dòng)物。
試驗(yàn)組和對(duì)照組的處理用水進(jìn)入單細(xì)胞培養(yǎng)池內(nèi)，然后接藻種，投入營養(yǎng)鹽和定時(shí)攪拌。生長密度對(duì)比見表 14 。
表 14 三角褐指澡生長密度對(duì)比（萬個(gè) /ml ）

表 15 試驗(yàn)與對(duì)照組生長速度表

試驗(yàn)結(jié)果表明，在水溫 10 — 20 o C 的條件下，臭氧投加量在 1g/m 3 時(shí)，就可以達(dá)到消毒凈化的結(jié)果，處理后的水放置 1 小時(shí)后即可使用。處理后的水中殘余臭氧具較強(qiáng)的消毒殺菌作用，也可消毒各種工具，使用簡便有效。培養(yǎng)出的單細(xì)胞藻類純凈，并節(jié)約大量的化學(xué)藥品。節(jié)省能源、勞力、質(zhì)金，在培養(yǎng)生物鉺料上使用前景廣闊。
2.4.3臭氧水對(duì)貝類的凈化的應(yīng)用試驗(yàn)
在貝類人工育苗不斷取得成功的基礎(chǔ)上，我國貝類生產(chǎn)呈迅速上升趨勢，貝類養(yǎng)殖產(chǎn)量在水產(chǎn)品比重中逐年增加，但是由于受海域污染的嚴(yán)重影響，尤其是渤海沿岸，使貝類的品質(zhì)受到嚴(yán)重威脅。有些品種嚴(yán)禁國內(nèi)銷售，多數(shù)品種也不能出口，貝類養(yǎng)殖生產(chǎn)處于較為困難、艱苦的階段，而其中最主要的原因就是水體的污染和水質(zhì)凈化問題。利用臭氧發(fā)生器技術(shù)來凈化水質(zhì)，進(jìn)行貝類的凈化試驗(yàn)改良貝類品質(zhì)，可以使貝類達(dá)到衛(wèi)生指標(biāo)。
試驗(yàn)以毛蚶、四角蛤蜊為主要品種，樣本取自塘沽沿海，先根據(jù)“食品衛(wèi)生檢驗(yàn)的規(guī)定”對(duì)樣本進(jìn)行本底測定。然后放入人工海水，通入臭氧，每 6 小時(shí)一次，每次 20 分鐘，臭氧投加量為 1g ／ m 3 ， 24 小時(shí)后測定水質(zhì)及衛(wèi)生指標(biāo)。試驗(yàn)以不加臭氧的海水作為對(duì)照組進(jìn)行。
試驗(yàn)結(jié)果表明，毛蚶、四角蛤蜊經(jīng)臭氧處理后，其體內(nèi)和環(huán)境中衛(wèi)生指標(biāo)和水化學(xué)指標(biāo)均獲得了明顯的改善。臭氧對(duì)貝類的細(xì)菌有強(qiáng)烈的抑制作用。對(duì)糞大腸菌群更具有強(qiáng)烈的殺滅作用，凈化作用顯著，井水質(zhì)增氧效果明顯，降解氨氮作用強(qiáng)，毛蚶和四角蛤蜊的活力增強(qiáng)，在 24 小時(shí)內(nèi)死亡率降低。試驗(yàn)證明了在使用臭氧處理水對(duì)貝類凈化的情況下，被污染的貝類可加快體內(nèi)污物的排除，伴隨呼吸作用的進(jìn)行，體內(nèi)有毒物質(zhì)不斷排出體外，排出體外的毒性物質(zhì)又被臭氧氧化。貝類此時(shí)不斷吸收環(huán)境中的新鮮水體，不斷沖洗自己體內(nèi)消化系統(tǒng)，及時(shí)排除，最終使貝類達(dá)到新鮮潔凈水平，達(dá)到食用標(biāo)準(zhǔn)。
2.4.4臭氧水對(duì)斑點(diǎn)叉尾魚人工繁殖的應(yīng)用
魔點(diǎn)叉尾魚是美國淡水水域和集約化養(yǎng)殖的主要經(jīng)濟(jì)魚類。我國自 1984 年引進(jìn)后，已成為具有發(fā)展前途的優(yōu)良品種。其苗種來源主要依靠人工繁殖。由于胚胎發(fā)育階段對(duì)水質(zhì)的要求較高，對(duì)收集的卵塊進(jìn)行人工孵化時(shí)要有潔凈的高溶解氧 (6 m/l) 水體。一般孵化方法，均采用不斷保持水體流動(dòng)交換，以達(dá)高溶氧要求。為保證受精卵和胚胎不受細(xì)菌、霉菌的侵害，孵化期間必須經(jīng)常使用消毒劑和抗生素，整個(gè)孵化過程要消耗大量藥物、勞力以及能源。為此，我們使用一般池塘水經(jīng)臭氧處理后，對(duì)斑點(diǎn)叉尾魚受精卵進(jìn)行孵化試驗(yàn)，并對(duì)幼苗進(jìn)行生長培育試驗(yàn)取得滿意結(jié)果。
受精卵取自薊縣水產(chǎn)育苗場，取親魚產(chǎn)后 12 小時(shí)的受精卵 60 克，均分成三塊。設(shè)三個(gè)試驗(yàn)組，將卵分別放入不同臭氧條件處理的水族箱中，并以薊縣育苗場的一般孵化方法可同步對(duì)照。經(jīng) 8 天孵化、破膜，計(jì)算孵化率。結(jié)果見表 16 。
表 16 臭氧對(duì)池塘水不同處理?xiàng)l件下的斑點(diǎn)叉尾魚回受精卵的孵化率的影響

試驗(yàn)結(jié)果表明，用臭氧水進(jìn)行孵化，可以不用消毒劑和抗生素，不用流水，只要每天按時(shí)通臭氧或更換用臭氧處理過的水，其孵化效果與一般流水藥溶處理方法所取得的效果相同。
幼苗破膜開始攝食后，繼續(xù)用臭氧水進(jìn)行培育，試驗(yàn)結(jié)果表明，每天換 1 ／ 4 臭氧水，其生長速度明顯加快，增重明顯。在 15 天的培育期間，其體重增長為對(duì)照組的 1.42~1.78 倍，見表 17 。
表 17 斑點(diǎn)叉尾魚幼苗體重增長率和成活率

在不換水的條件下，幼苗很快發(fā)生了魚病，眼部粘細(xì)菌感染，將其 1 ／ 2 魚放入臭氧水中， 10 ％，而另 1 ／ 2 魚保持原有環(huán)境 ( 不用臭氧水 ) ，則死亡率為 35 ％。
2.5 臭氧對(duì)魚體生長速度作用效果的試驗(yàn)則死亡率
水產(chǎn)養(yǎng)殖和海淡水育苗用水經(jīng)臭氧處理后，不但水質(zhì)狀況得到了明顯的改善，而且對(duì)水中生物的生長起到了明顯的促進(jìn)作用。為了探索臭氧對(duì)魚體生長速度作用影響，用羅非魚和紅鯽魚分別就臭氧對(duì)亞硝酸鹽消除，臭氧對(duì)魚體內(nèi)微生態(tài)環(huán)境的影響兩個(gè)方面進(jìn)行了試驗(yàn)，對(duì)臭氧促進(jìn)魚體生長的問題進(jìn)行初步探討。
2.5.1臭氧消除亞硝酸鹽對(duì)生長的抑制試驗(yàn)
2.5.1.1 方法
試驗(yàn)用紅鯽魚，取自寧河換新魚種場，共計(jì) 160 尾，分成四組，每組 40 尾。分別放入水體為 0.2m 3 的 4 個(gè)水族箱中， 1 # 每天用臭氧水處理機(jī)處理，臭氧量為 3g ／小時(shí)， I 每天投加二次，每次 20 分鐘，亞硝酸鹽濃度保持在 0.068 ～ 0.77 mg ／ l 之間。 2 # ～ 4 # 亞硝酸濃度分別在 2.0 、 4.0 、 6.0 mg ／ l ，不用臭氧水， 4 個(gè)水族箱每天充氣 2 次，每周換水 2 次，每次換水 1 ／ 3 。每天喂人工飼料 3 次，每次 5 — 8 克， 20 天后魚體稱重。
5.1.2結(jié)果
從表中可以看出， 1 # 紅鯽魚體凈重量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其它組。區(qū)別在于 1# 每天通入兩次濃度為 0.5 g ／ m 3 的臭氧，使亞硝酸鹽維持在一個(gè)較低水平。
為了確定增重與亞硝鹽濃度關(guān)系，除 1 # 充臭氧水， 2--4 # 停止加入亞硝酸鹽，經(jīng)過 20 天飼養(yǎng)，結(jié)果見表 18 ，表 19 ，圖 7 。
表 18 沖入臭氧組與未沖臭氧組魚體重量對(duì)比結(jié)果

表 19 魚體增重速度與亞硝酸根離子濃度的關(guān)系

經(jīng)計(jì)算紅鯽魚日增重與亞硝酸鹽濃度的相關(guān)系數(shù)為 -0.9979 ，經(jīng) t 檢驗(yàn)得到 t>>t 0.001 ， P<0.001 ，二者呈極顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系。
2.5.2臭氧對(duì)魚類腸道微生態(tài)環(huán)境的作用
臭氧對(duì)細(xì)菌、霉菌和病毒具有強(qiáng)烈的殺滅作用，其作用機(jī)制為：作用于細(xì)胞膜導(dǎo)致膜的通透性增加，細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)外流。作用于細(xì)胞活動(dòng)必需的酶，使其活性喪失。破壞細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)。因此，臭氧在水中作用，改變了細(xì)菌等微生態(tài)群落組成，但臭氧是否也可以改變魚體內(nèi)腸道微生態(tài)環(huán)境，間接影響魚類消化及其它功能，如腸道細(xì)菌分泌的淀粉酶可以幫助消化，為此研究了臭氧對(duì)魚腸道細(xì)菌總數(shù)細(xì)菌淀粉酶活性影響的試驗(yàn)。
2.5.2.1 方法
試驗(yàn)用羅非魚苗，取自本所淡水站越冬池。將魚腸分為前中后三段，每段刮取腸壁上一些物質(zhì)和腸中食物，分別進(jìn)行細(xì)菌總數(shù)和細(xì)菌淀粉?；钚缘臏y定。
2.5.2.2 試驗(yàn)結(jié)果
在魚腸內(nèi)，前、中腸壁上細(xì)菌總數(shù)影響很大，細(xì)菌總數(shù)降低 7 — 16 倍，后腸也有所下降。其結(jié)果與水中細(xì)菌總數(shù)下降幅度相似。說明臭氧水也會(huì)影響魚腸道內(nèi)的微生態(tài)環(huán)境。同時(shí)表明由細(xì)菌分泌的淀粉酶活性也有較大改變。說明經(jīng)臭氧處理后，腸壁上細(xì)菌總數(shù)明顯降低，但細(xì)菌淀粉酶活力顯著升高，而食糜中細(xì)菌的淀粉酶活力沒有顯著變化。淀粉酶活力升幅最大的為前腸，而后腸最小。
2.5.3分析和討論
2.5.3.1 臭氧解除了亞硝酸離子對(duì)魚體生長速度的抑制作用
試驗(yàn)表明，臭氧可大幅降解亞硝酸離子，亞硝酸離子是硝化作用的中間產(chǎn)物。它的超量存在，使魚體內(nèi)高鐵血紅蛋白 (MHB) 隨 N0 2 - 升高而呈指數(shù)形式增加，從而降低了血紅蛋白 (HB) 在魚體內(nèi)輸送氧的能力，使魚呼吸頻率加快，體能消耗增大。經(jīng)臭氧作用后，水體中溶解氧大幅提高，硝化作用增強(qiáng)，中間產(chǎn)物的 NO 2 - 向無毒的 NO 3 - 發(fā)展，從而消除了 NO 2 - 對(duì)魚體生長抑制，魚體生長速度也就必然提高。
2.5.3.2 臭氧對(duì)腸道細(xì)菌總數(shù)的影響
魚類腸道內(nèi)的細(xì)菌、腸粘膜、食糜、消化液一起構(gòu)成腸道微生態(tài)環(huán)境。試驗(yàn)表明，臭氧處理后，前腸細(xì)菌大幅度減少，微生態(tài)環(huán)境得到改善，從養(yǎng)分流失和宿主患病兩方面解除了宿主生長的制約因素，另外中腸細(xì)菌減少也可降低被細(xì)菌消耗的養(yǎng)分。所有一切，都提高了宿主食物的利用率。
2.5.3.3 臭氧對(duì)腸道細(xì)菌淀粉酶活性的影響
經(jīng)臭氧處理后的水體，羅非魚后腸細(xì)菌分泌淀粉酶明顯提高，表明一些有益的細(xì)菌成為腸道優(yōu)勢菌。細(xì)菌淀粉酶對(duì)食物淀粉的消化比魚體自身分泌的酶更徹底，這樣兩者分泌的酶的共同作用將食物更徹底地消化，增加了對(duì)淀粉、糖類的吸收，提高了羅非魚對(duì)食物的利用率，促進(jìn)了魚體生長。
2.6 臭氧對(duì)治療細(xì)菌性魚病的試驗(yàn)
細(xì)菌性魚病在整個(gè)魚病中占有很大的比例，它具有發(fā)病快、傳染性強(qiáng)、死亡率高、治愈率低，往往造成養(yǎng)魚的重大經(jīng)濟(jì)損失。以往的試驗(yàn)都證明了利用臭氧處理后的臭氧水具有強(qiáng)烈的殺滅細(xì)菌，降解有機(jī)物，改善水質(zhì)提高水體的溶解氧的含量等特性。為此，應(yīng)用臭氧水進(jìn)行了治療細(xì)菌性魚病的試驗(yàn)。
2.6.1試驗(yàn)材料與方法
試驗(yàn)用病魚， 1. 來自薊縣水廣技術(shù)推廣站育苗場，為斑點(diǎn)叉勵(lì)回腐爛病，當(dāng)時(shí)病魚的癥狀為體長 18 cm 一 28 cm ，尾鰭胸鰭腐爛，鰭條腐爛，鰭條骨外露，體表部分潰爛。光學(xué)顯微鏡檢查病灶，有大量桿狀細(xì)菌 (+++) ，無其它類型病原產(chǎn)生。 2. 來自東麗區(qū)赤土鎮(zhèn)的鯉魚赤皮病，主要癥狀為：體長 14 cm-20 cm ，具有典型鯉魚赤皮病癥狀，光學(xué)顯微鏡檢查病灶處，有大量細(xì)菌產(chǎn)生 (+++) ，無其它類型病原。
試驗(yàn)設(shè)計(jì)為兩組，即用臭氧的試驗(yàn)組和不用臭氧的對(duì)照組。臭氧試驗(yàn)組的水中臭氧濃度為 (0.1 — 0.3) mg/l 。試驗(yàn)期間不換水，全部充氣，避免因缺氧而引起魚的死亡，同時(shí)保持正常的溶解氧水平。發(fā)現(xiàn)病魚死亡時(shí)，立即測定水中溶解氧含量，以排除因缺氧而死亡的原因，每隔一天測定一次化學(xué)指標(biāo)，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，計(jì)算死亡率，以確定治療效果。
2.6.2試驗(yàn)結(jié)果
試驗(yàn)結(jié)束后，用臭氧的試驗(yàn)組斑點(diǎn)叉尾魚病魚全部治愈，無死亡，而對(duì)照組死亡率為 83.3 ％。鯉魚赤咖試驗(yàn)組病魚死亡率為 25 ％，對(duì)照組為 87.5 ％，對(duì)照組病魚癥狀加重，病灶創(chuàng)面增大，活動(dòng)無力最后，導(dǎo)致死亡。乙： 以上試驗(yàn)證明了臭氧對(duì)治療細(xì)菌性魚病方面，具有良好的治療效果，對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)在魚病防治上·將發(fā)揮很大的作用。具體見表 20 。質(zhì)檢測結(jié)果表明，試驗(yàn)組的物量和細(xì)菌總數(shù)都大幅度下菌總數(shù)由 1.3*10 7 個(gè)／ ml 下降為 25 個(gè)／ ml 。浮游植物由 25029 萬 /l ，下降為 46.35 萬個(gè) /l ，浮游植物生物量由 42.63 mg ／ l 下降為 0.23 mg/l 。說明水體中上述指標(biāo)的水質(zhì)已達(dá)潔凈程度，無疑對(duì)魚病治療和魚體恢復(fù)起著很大作用。利用臭氧的試驗(yàn)組的亞硝酸鹽始終來測出，這樣也解除了亞硝酸鹽對(duì)病魚的毒害作用，也是病魚治療的一個(gè)重要原因。